Criado microscópio, que permite observar os movimentos de células dentro do organismo
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Pesquisadores do instituto Médico Howard Hughes aperfeiçoando o método de microscopia fluorescente de tal forma que agora você pode tirar fotos em alta resolução de processos dinâmicos que ocorrem em um organismo vivo. Os resultados de seu trabalho, os cientistas compartilharam na revista científica Science, e um exemplo de visualização de processos dinâmicos, que fez tirar de circulação de células do sistema imunológico em um embrião de peixe, foi apresentado em um artigo da revista Nature.
Com o atual oportunidades de microscopia de luz, em particular fluorescente microscopia eletrônica de varredura de alta resolução, os cientistas podem considerar o mesmo tridimensionais fragmentos de tecidos vivos. Os primeiros trabalhos de recuperação de дифракционного limite de resolução de luz do microscópio e o desenvolvimento de métodos não-invasiva fluorescente visualização pertencem Eric Бетцигу, Штефану Хеллу e William Мернеру. Por isso os cientistas receberam o prêmio Nobel de química em 2014.
Os Pesquisadores decidiram não parar. Assim? um dos mais recentes desenvolvimentos Бетцига tornou-se флюоресцентная microscopia planar de iluminação (light sheet fluorescence microscopy), que permite visualizar o volumoso ao vivo de amostras biológicas por um longo tempo. E a sua modificação, a microscopia de luz, a folha, com discreta iluminação (lattice light sheet microscopy — LLSM), permite visualizar rápidos processos dinâmicos. A base dos dois métodos reside rápida varredura de uma amostra fina plano, o feixe de luz, que permite acumular um grande número de imagens bidimensionais, que, em seguida, ingressar em um modelo tridimensional.
Esses métodos, no entanto, tem suas limitações. Por exemplo, a heterogeneidade do tecido circundante introduz distorções na determinação do sinal, o que reduz a resolução da imagem. Mesmo na ausência de distorção de alta resolução requer uma alta intensidade de radiação, resultando viva a amostra pode ficar danificado. A obtenção de mais alta qualidade de imagem ainda exigiu a fixação e preparação especial das amostras.
A Equipe Бетцига foi capaz de contornar essas limitações e apresentou combinado com a técnica de microscopia eletrônica de varredura, com o qual os cientistas foram capazes de observar a vários processos para a direita dentro de um organismo vivo. Os pesquisadores receberam uma imagem do movimento клатриновых de bolhas, a dinâmica da organela celular, o crescimento отростков de células nervosas na indústria da medula espinhal e mover células imunes para o embrião do modelo de peixes danio-zebrafish. No vídeo abaixo, por exemplo, mostra a migração de células do sistema imunológico em перилимфатическое espaço orelha interna de um embrião.
Para a modernização do método de LLSM os cientistas usaram técnicas de óptica adaptativa, utilizados na criação de telescópios terrestres, utilizados para a astronomia. A equipe Бетцига измеряла a magnitude da distorção na definição de especial fluorescente etiqueta e ajustado-los com o mutável forma de adaptação do espelho. Combinado a técnica recebeu o nome AO-LLSM. Reduzir фототоксичность feixe era possível com a ajuda de restrição de iluminação apenas uma fina plano da amostra sem irradiação-lo do volume principal.
Os pesquisadores esperam que o seu desenvolvimento vai ajudar significativamente para o avanço no estudo de células em seu ambiente natural. Agora, a equipe pensa sobre como reduzir o custo semelhante a um microscópio, e também sobre como torná-lo mais compacto. No momento, a instalação do microscópio leva трехметровый de trabalho.
Http://www.youtube.com/watch?v=VY_v6G_ZLzE
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